分子中蛋白質(zhì)折疊的影響
蛋白質(zhì)是構(gòu)成生命體的基本物質(zhì),人們很早就認(rèn)識(shí)到蛋白質(zhì)的功能,我們?cè)诤芏嗟鞍踪|(zhì)的研究中發(fā)現(xiàn)只有蛋白質(zhì)測(cè)定儀在實(shí)驗(yàn)中是用處最大的一款儀器,可以節(jié)省很多的時(shí)間和精力。但是要完全闡明蛋白質(zhì)發(fā)揮功能的機(jī)制通常需要它的信息結(jié)構(gòu),這些信息結(jié)構(gòu)不僅僅為其單獨(dú)發(fā)揮功能提供依據(jù),也為蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用提供了結(jié)構(gòu)學(xué)上的依據(jù)。研究蛋白質(zhì)折疊的過(guò)程,尤其是折疊的早期過(guò)程,即新生肽段的折疊過(guò)程是最終全面闡明中心法則的一個(gè)根本問(wèn)題。在這一領(lǐng)域中,近年來(lái)的新發(fā)現(xiàn)對(duì)新生肽段能夠自發(fā)進(jìn)行折疊的傳統(tǒng)概念做了根本的修正。在生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究中,分離、提純蛋白質(zhì)是重要而繁鎖的工作。生物體中各種蛋白質(zhì)的氨基酸組成(或構(gòu)筑)不盡相同。鑒定純蛋白的最基本方法之一是測(cè)定其氨基酸的組分及含量。
幾年來(lái),我們對(duì)一些蛋白質(zhì)樣品 (達(dá)電泳純)進(jìn)行氨基酸分析,為鑒定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與純度提供了一項(xiàng)指標(biāo)。有些蛋白質(zhì)是國(guó)內(nèi)首次提取或報(bào)道。鑒定蛋白質(zhì)的性質(zhì)與純度,需要分析氨基酸的組成及含量。氨基酸分析定量準(zhǔn)確程度與蛋白質(zhì)的水解條件至關(guān)重要。我們?cè)陔p蒸水與優(yōu)級(jí)純鹽酸共沸而蒸得的5.7mol/L 鹽酸水解浪中加入適量苯酚和琉基乙酸,能有效防止酪氨酸、甲硫氨酸等易氧化組分的破壞。氨基酸分析也是探討蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的途徑之一。這些關(guān)系各器官功能的活性蛋白質(zhì),氨基酸組成各有其特點(diǎn)。將分析數(shù)據(jù)輸入電腦,用自編程序,可以按標(biāo)準(zhǔn)模式繪制出各蛋白質(zhì)的氨基酸組成的特征圖像,便于鑒別。
在分離純化重組 DNA 技術(shù)基因工程表達(dá)產(chǎn)物時(shí),很多利用大腸桿菌為宿主細(xì)胞的外源基因表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)聚集成沒(méi)有生物活性的固體顆粒包含體。這些基因表達(dá)產(chǎn)物的一級(jí)結(jié)構(gòu)雖然正確,但其立體結(jié)構(gòu)是錯(cuò)誤的,所以沒(méi)有生物活性。因此,為獲得天然狀態(tài)的目標(biāo)產(chǎn)物,必須在分離回收包含體后,溶解包含體并設(shè)法使其中的目標(biāo)蛋白質(zhì)恢復(fù)應(yīng)有的天然構(gòu)象和活性。分子伴侶幫助變性蛋白質(zhì)正確折疊的功能為解決上述困難提供了可能。近來(lái)利用固定化分子伴侶 GroE,研究了其對(duì)變性溶菌酶的復(fù)性作用,解決了分子伴侶的重復(fù)利用問(wèn)題。有研究表明,分子伴侶在疾病診斷、環(huán)境檢測(cè)、物種鑒定、腫瘤治療、生物產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、農(nóng)作物育種等方面都有十分廣闊的應(yīng)用前景?傊,分子伴侶的研究成果必然會(huì)大大加深我們對(duì)生命現(xiàn)象的認(rèn)識(shí),同時(shí)也一定會(huì)增強(qiáng)我們與自然斗爭(zhēng)的能力和自身生存的能力。中國(guó)糧油儀器網(wǎng) http://m.web-tv.com.cn/