葉綠素含量與廣玉蘭葉片黃化的關(guān)系
來源： http://m.web-tv.com.cn/ 類別：實(shí)用技術(shù) 更新時(shí)間：2013-02-01 閱讀次
【本資訊由中國(guó)糧油儀器網(wǎng)提供】 廣玉蘭葉片黃化一般先從嫩梢上的幼葉先失綠，表現(xiàn)出病癥；然后由上向下、由葉緣向葉基擴(kuò)展，后逐漸擴(kuò)展到葉肉組織，葉脈仍保持綠色；接著葉脈也失綠，導(dǎo)致整片葉變?yōu)槿辄S色至乳白色；嚴(yán)重時(shí)，葉緣焦枯，乃至全葉干枯、脫落。其主要病因是由于缺鐵造成的。經(jīng)過葉綠素含量測(cè)定儀的驗(yàn)證，缺鐵將會(huì)造成葉綠素的含量降低，然后致使黃化病，廣玉蘭感染黃化病會(huì)嚴(yán)重影響園林景觀效果，并可造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。
以鄭州市綠化栽植的生長(zhǎng)發(fā)育程度一致但黃化程度不同的10a生的廣玉蘭為材料，對(duì)黃化癥狀進(jìn)行分級(jí)。具體標(biāo)準(zhǔn)為：0級(jí)：樹體葉片顏色正常，沒有黃化葉片，長(zhǎng)勢(shì)良好；Ⅰ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例不到整株葉片的1/4；Ⅱ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例多于整株葉片的1/4、但少于1/2；Ⅲ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例多于整株葉片的1/2、但少于3/4；Ⅳ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例多于整株葉片的3/4，直到樹體發(fā)黃，確定為4級(jí)。用清水清洗各個(gè)級(jí)別的葉片，然后再用純凈水清洗一遍，置于通風(fēng)處晾干，將其分別裝入自封袋內(nèi)備用。依次檢測(cè)其葉綠素含量及POD、SOD活性和MDA(丙二醛)濃度。①綠素含量。不同級(jí)別葉片葉綠素含量測(cè)定方法參考李合生主編的植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)。②POD檢測(cè)。過氧化物酶活性的測(cè)定參考孫群、胡景江主編的植物生理學(xué)研究技術(shù)。③SOD檢測(cè)。超氧化物歧化酶的測(cè)定采用氮藍(lán)四唑(NBT)法測(cè)定。④MDA檢測(cè)。稱取剪碎的材料0.5g，加入1mL10%的TCA和少量石英沙，研磨至勻漿，再加入4mLTCA進(jìn)一步研磨，勻漿，在3000r•min－1下離心10min，吸取離心的上清液2mL(對(duì)照加入2mLTCA)，加入0.67%的TB溶液2mL，混合后將混合物置于沸水浴中反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定在450nm、532nm和600nm波長(zhǎng)下的吸光度，并按以下公式計(jì)算出MDA濃度。
葉綠素含量與葉片黃化的面積有直接關(guān)系，隨著葉片失綠、黃化程度的加重，葉綠素a與葉綠素b含量均明顯降低。葉綠素a含量由正常葉片的0.21mg•L－1逐級(jí)降至0.03mg•L－1，葉綠素b含量由正常葉片的0.08mg•L－1逐級(jí)降至0.01mg•L－1；Ⅳ級(jí)黃化葉片中葉綠素a的含量較正常葉片的含量降低了86.0%，葉綠素b的含量降低了87.5%。葉綠素a與葉綠素b的比值隨著葉片黃化程度的加重而增大，這說明葉片黃化對(duì)葉綠素b含量的影響要大于對(duì)葉綠素a含量的影響。分析原因，在外界環(huán)境的影響下，葉綠素b較葉綠素a更容易降解。葉綠素含量的降低直接影響植物的光合作用及其效率，并使類胡蘿卜素含量增大，最終導(dǎo)致葉片變黃。
隨著黃化程度的加重，SOD、POD的活性均呈下降趨勢(shì)，分別由正常葉片的1.04降至0.47和1.00降至0.65；0級(jí)、Ⅰ級(jí)的酶活性變化不明顯，而Ⅱ級(jí)到Ⅳ級(jí)的酶活性變化比較顯著。SOD、POD的活性減低嚴(yán)重影響了正常代謝過程。MDA的濃度則呈上升狀態(tài)，從0.44升至1.00，0級(jí)、Ⅰ級(jí)的濃度變化不明顯，而Ⅱ級(jí)到Ⅳ級(jí)的變化比較顯著。丙二醛是植物體內(nèi)過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，影響線粒體呼吸鏈復(fù)合物及關(guān)鍵酶活性，最終使蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子發(fā)生交聯(lián)聚合，且具有細(xì)胞毒性。因此，隨著植物體內(nèi)丙二醛含量的增高，這種作用就會(huì)越加嚴(yán)重，從而使葉片細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能受到破壞，蛋白氧化變性、酶活性明顯降低。
隨著葉片失綠、黃化程度的加重，葉綠素a與葉綠素b含量均明顯降低。葉綠素a含量由正常葉片的0.21mg•L－1逐級(jí)降至0.03mg•L－1，葉綠素b含量由正常葉片的0.08mg•L－1逐級(jí)降至0.01mg•L－1；Ⅳ級(jí)黃化葉片中葉綠素a的含量較正常葉片的含量降低了86.0%，葉綠素b的含量降低了87.5%。葉綠素a與葉綠素b的比值隨著葉片黃化程度的加重而增大，葉片黃化對(duì)葉綠素b含量的影響要大于對(duì)葉綠素a含量的影響。葉綠素含量的降低直接影響植物的光合作用及其效率，并使類胡蘿卜素含量增大，最終導(dǎo)致葉片變黃。SOD、POD的活性均呈下降趨勢(shì)，分別由正常葉片的1.04降至0.47和1.00降至0.65；植物在逆境條件下體內(nèi)出現(xiàn)的傷害以及植物對(duì)逆境的不同抵抗能力與體內(nèi)的SOD、POD活性有關(guān)，這些酶具有清除自由基的能力，可以減輕膜脂過氧化程度，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。而如何增強(qiáng)SOD、POD的活性是防治廣玉蘭黃化病的關(guān)鍵問題，需要做進(jìn)一步的研究。
MDA的濃度則呈上升狀態(tài)，從0.44升至1.00，影響線粒體呼吸鏈復(fù)合物及關(guān)鍵酶活性，最終使蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子發(fā)生交聯(lián)聚合，使其失去正常生理機(jī)能，影響了廣玉蘭的生長(zhǎng)。文章中使用的葉綠素含量測(cè)定儀由浙江托普儀器有限公司提供，推薦同類儀器：粗脂肪測(cè)定儀。
以鄭州市綠化栽植的生長(zhǎng)發(fā)育程度一致但黃化程度不同的10a生的廣玉蘭為材料，對(duì)黃化癥狀進(jìn)行分級(jí)。具體標(biāo)準(zhǔn)為：0級(jí)：樹體葉片顏色正常，沒有黃化葉片，長(zhǎng)勢(shì)良好；Ⅰ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例不到整株葉片的1/4；Ⅱ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例多于整株葉片的1/4、但少于1/2；Ⅲ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例多于整株葉片的1/2、但少于3/4；Ⅳ級(jí)：樹體出現(xiàn)黃化葉片，比例多于整株葉片的3/4，直到樹體發(fā)黃，確定為4級(jí)。用清水清洗各個(gè)級(jí)別的葉片，然后再用純凈水清洗一遍，置于通風(fēng)處晾干，將其分別裝入自封袋內(nèi)備用。依次檢測(cè)其葉綠素含量及POD、SOD活性和MDA(丙二醛)濃度。①綠素含量。不同級(jí)別葉片葉綠素含量測(cè)定方法參考李合生主編的植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)。②POD檢測(cè)。過氧化物酶活性的測(cè)定參考孫群、胡景江主編的植物生理學(xué)研究技術(shù)。③SOD檢測(cè)。超氧化物歧化酶的測(cè)定采用氮藍(lán)四唑(NBT)法測(cè)定。④MDA檢測(cè)。稱取剪碎的材料0.5g，加入1mL10%的TCA和少量石英沙，研磨至勻漿，再加入4mLTCA進(jìn)一步研磨，勻漿，在3000r•min－1下離心10min，吸取離心的上清液2mL(對(duì)照加入2mLTCA)，加入0.67%的TB溶液2mL，混合后將混合物置于沸水浴中反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定在450nm、532nm和600nm波長(zhǎng)下的吸光度，并按以下公式計(jì)算出MDA濃度。
葉綠素含量與葉片黃化的面積有直接關(guān)系，隨著葉片失綠、黃化程度的加重，葉綠素a與葉綠素b含量均明顯降低。葉綠素a含量由正常葉片的0.21mg•L－1逐級(jí)降至0.03mg•L－1，葉綠素b含量由正常葉片的0.08mg•L－1逐級(jí)降至0.01mg•L－1；Ⅳ級(jí)黃化葉片中葉綠素a的含量較正常葉片的含量降低了86.0%，葉綠素b的含量降低了87.5%。葉綠素a與葉綠素b的比值隨著葉片黃化程度的加重而增大，這說明葉片黃化對(duì)葉綠素b含量的影響要大于對(duì)葉綠素a含量的影響。分析原因，在外界環(huán)境的影響下，葉綠素b較葉綠素a更容易降解。葉綠素含量的降低直接影響植物的光合作用及其效率，并使類胡蘿卜素含量增大，最終導(dǎo)致葉片變黃。
隨著黃化程度的加重，SOD、POD的活性均呈下降趨勢(shì)，分別由正常葉片的1.04降至0.47和1.00降至0.65；0級(jí)、Ⅰ級(jí)的酶活性變化不明顯，而Ⅱ級(jí)到Ⅳ級(jí)的酶活性變化比較顯著。SOD、POD的活性減低嚴(yán)重影響了正常代謝過程。MDA的濃度則呈上升狀態(tài)，從0.44升至1.00，0級(jí)、Ⅰ級(jí)的濃度變化不明顯，而Ⅱ級(jí)到Ⅳ級(jí)的變化比較顯著。丙二醛是植物體內(nèi)過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，影響線粒體呼吸鏈復(fù)合物及關(guān)鍵酶活性，最終使蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子發(fā)生交聯(lián)聚合，且具有細(xì)胞毒性。因此，隨著植物體內(nèi)丙二醛含量的增高，這種作用就會(huì)越加嚴(yán)重，從而使葉片細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能受到破壞，蛋白氧化變性、酶活性明顯降低。
隨著葉片失綠、黃化程度的加重，葉綠素a與葉綠素b含量均明顯降低。葉綠素a含量由正常葉片的0.21mg•L－1逐級(jí)降至0.03mg•L－1，葉綠素b含量由正常葉片的0.08mg•L－1逐級(jí)降至0.01mg•L－1；Ⅳ級(jí)黃化葉片中葉綠素a的含量較正常葉片的含量降低了86.0%，葉綠素b的含量降低了87.5%。葉綠素a與葉綠素b的比值隨著葉片黃化程度的加重而增大，葉片黃化對(duì)葉綠素b含量的影響要大于對(duì)葉綠素a含量的影響。葉綠素含量的降低直接影響植物的光合作用及其效率，并使類胡蘿卜素含量增大，最終導(dǎo)致葉片變黃。SOD、POD的活性均呈下降趨勢(shì)，分別由正常葉片的1.04降至0.47和1.00降至0.65；植物在逆境條件下體內(nèi)出現(xiàn)的傷害以及植物對(duì)逆境的不同抵抗能力與體內(nèi)的SOD、POD活性有關(guān)，這些酶具有清除自由基的能力，可以減輕膜脂過氧化程度，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。而如何增強(qiáng)SOD、POD的活性是防治廣玉蘭黃化病的關(guān)鍵問題，需要做進(jìn)一步的研究。
MDA的濃度則呈上升狀態(tài)，從0.44升至1.00，影響線粒體呼吸鏈復(fù)合物及關(guān)鍵酶活性，最終使蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子發(fā)生交聯(lián)聚合，使其失去正常生理機(jī)能，影響了廣玉蘭的生長(zhǎng)。文章中使用的葉綠素含量測(cè)定儀由浙江托普儀器有限公司提供，推薦同類儀器：粗脂肪測(cè)定儀。
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