兩種葉綠素含量測定方法比較
兩種葉綠素含量測定方法比較
葉綠素是植物葉片的主要光和色素,是光合作用發(fā)生的主要場所。光合作用是植物合成和積累有機(jī)物的過程,葉綠素含量的多少,直接影響著作物的光合作用。而光合作用又和作物的產(chǎn)量密切相關(guān)。因此,最終葉綠素的含量與產(chǎn)量是有關(guān)聯(lián)的。我們?nèi)绻胍芯孔魑锏漠a(chǎn)量,就會自然的聯(lián)想到先測定植物的葉綠素含量,找到葉綠素含量與作物產(chǎn)量間的關(guān)系,之后再來預(yù)測作物的產(chǎn)量。
在實驗室里,我們通常使用分光光度計進(jìn)行葉綠素含量的測定,分光光度法測定結(jié)果可靠,但是在測定時需要損傷葉片和組織,不利于對植物的系統(tǒng)研究。帶著這個困難,我們研發(fā)了可以無損測定葉片葉綠素含量的儀器-SPAD-502葉綠素計。這樣,又一種新的測定葉綠素含量的方法誕生了,而且通過研究我們發(fā)現(xiàn),SPAD-502測定的SPAD值與葉綠素含量呈線性相關(guān),通過葉綠素計,我們可以很快得到植物的葉綠素含量。
實驗過程:1.我們用SPAD-502手持葉綠素儀于花期對玉米功能葉片中部進(jìn)行活體測定,每個材料取3個葉片,然后求平均值。使用手持葉綠素儀非常方便,你只需將葉片夾在葉綠素計中間,然后按下測量頭,儀器的液晶顯示屏上就能夠顯示葉片的SPAD值。2.將葉綠素計法測定完的葉片取回進(jìn)行分光光度計法測定。用毛刷刷去表面雜質(zhì),用水沖洗,擦干,備用。每個葉片在中部用直徑9mm打孔器打孔,取6個圓形葉片,稱重后放于15mL試管,用10mL95%乙醇避光浸泡96h,浸泡過程中每天混勻2次,葉片完全變白后進(jìn)行比色,于665、649、470nm波長測量光密度值,計算葉綠素含量,取3個葉片的平均值作為該材料的含量值。
研究結(jié)果表明,用便攜式葉綠素儀測定的葉綠素值與用分光光度法測定的結(jié)果無顯著差異,也就是說,我們可以用葉綠素計來替代分光光度法。葉色值法測定葉綠素含量具有可行性、優(yōu)越性。它改善了葉綠素含量的測定方法,彌補(bǔ)了傳統(tǒng)的分光光度計測定方法的不足。因為便攜式葉綠素儀可以快速、準(zhǔn)確、無損傷地對葉綠素含量進(jìn)行測定,為同一功能葉片在任何天氣條件下,進(jìn)行多個時期、多個研究項目的多次測定提供了依據(jù)。