青菜葉片中的葉綠素測(cè)定原理及方法
我們知道，葉綠素存在于各種果蔬等綠色植物中，而且不同蔬菜中含量不同。葉綠素含量直接影響果蔬的光合作用能力和干物質(zhì)積累，并且最終影響果蔬產(chǎn)量，所以測(cè)定果蔬葉片葉綠素含量，為研究不同品種系果蔬生理特性、挖掘生產(chǎn)潛力和品種資源提供科學(xué)依據(jù)。
以青菜為材料，用提取和分離葉綠體色素并進(jìn)行理化性質(zhì)測(cè)定和葉綠素含量分析。原理如下：
1.葉綠素和類胡蘿卜素都不溶于水而溶于有機(jī)溶劑，常用95%的乙醇或80%的丙酮提取。
2.皂化反應(yīng)。葉綠素是二羧酸酯，與強(qiáng)堿反應(yīng)，形成綠色的可溶性葉綠素鹽，就可與有機(jī)溶劑中的類胡蘿卜素分開(kāi)。
3.取代反應(yīng)。在酸性或加溫條件下，葉綠素卟啉環(huán)中的Mg2+,可依次被H+和Cu2+取代形成褐色的去鎂葉綠素和綠色的銅代葉綠素。
4.葉綠素受光激發(fā)，可發(fā)出紅色熒光，反射光下可見(jiàn)紅色熒光。
5.定量分析。葉綠素吸收紅光和藍(lán)紫光，紅光區(qū)可用于定量分析，其中645和663用于定量葉綠素a,b及總量，而652可直接用于總量分析。
通過(guò)這種原理測(cè)定葉綠素需要根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算，步驟較為繁瑣。如今，只要借助葉綠素儀對(duì)青菜葉進(jìn)行測(cè)定，5秒內(nèi)就能得出青菜葉綠素含量。此方法測(cè)量簡(jiǎn)便，將葉綠素測(cè)定儀的測(cè)量頭夾住青菜葉片，按下測(cè)量頭，儀器就能自動(dòng)顯示葉綠素含量。為果蔬等綠色植物的葉綠素測(cè)定提供技術(shù)支持。
